大鼠模型中局部与全身吡非尼酮预防声门狭窄的比较评估

要点

1. 喉狭窄的特征是成纤维-炎症性失调，导致胶原过度沉积和纤维化，但目前尚无有效的药物预防措施。
2. 吡非尼酮（Pirfenidone）是一种抗纤维化药物，本研究在博来霉素诱导的大鼠声门狭窄模型中，分别评估了局部给药和全身给药两种途径。
3. 与对照组相比，局部和全身给药均可显著减少肉眼可见的声门狭窄，但只有全身治疗在组织学纤维化和Ⅰ型胶原表达方面表现出显著降低。
4. 这些结果支持进一步探索局部吡非尼酮作为一种可能更微创的声门狭窄预防治疗方案。

研究背景

声门狭窄通常由喉部异常创伤愈合引起，多发生于黏膜损伤之后，并可导致成纤维-炎症性改变及胶原大量积聚，从而引起气道变窄。该病可造成明显的发病负担，包括气道阻塞和发声质量受损。当前治疗主要依赖手术干预，但常并发复发性纤维化，这凸显了亟需有效药物预防措施以调控纤维化重塑。

吡非尼酮是一种已确立疗效的抗纤维化药物，可用于特发性肺纤维化。其作用机制包括调控转化生长因子-β（transforming growth factor-beta，TGF-β）信号通路、抑制胶原合成以及抗炎作用。然而，其在预防喉部纤维化和狭窄方面的应用尚未得到系统研究，尤其是全身给药与局部给药的比较研究仍然不足。

研究设计

本项临床前研究采用雄性Wistar大鼠博来霉素诱导的声门及声门下损伤模型，以模拟喉部纤维化和狭窄。共30只动物接受内镜下博来霉素给药以诱导黏膜损伤，随后随机分为3组：局部吡非尼酮组（每次10毫克，分别于第0、3、7和14天给药）、全身吡非尼酮组（40毫克/千克/天，口服14天）或未治疗对照组。

主要终点包括：由2名盲法观察者在4周时对声门狭窄进行肉眼分级，以及对组织纤维化、上皮损伤和炎症标志物进行半定量组织病理学评分。免疫组织化学检测定量分析Ⅰ型胶原、TGF-β1、α-平滑肌肌动蛋白（alpha-smooth muscle actin，α-SMA）和CD4阳性细胞，以阐明其抗纤维化和免疫调节作用。统计学分析采用Fisher确切检验和Kruskal-Wallis检验，并对死亡结局进行相应敏感性分析。

主要结果

最初纳入的30只大鼠中，25只完成研究：对照组7只、全身吡非尼酮组9只、局部吡非尼酮组9只。研究期间共发生5例死亡（对照组3例、全身组1例、局部组1例），生存差异无统计学意义（log-rank检验，p=0.386）。

肉眼狭窄：总体差异有统计学意义（p=0.015）。与对照组相比，全身给药组（p=0.014）和局部给药组（p=0.010）的声门狭窄评分均显著降低，两种给药途径之间差异无统计学意义（p=0.531）。将死亡结局按最差结果纳入的敏感性分析证实了上述结论。

组织病理学纤维化与Ⅰ型胶原：各组间黏膜下纤维化评分差异有统计学意义（p=0.005），Ⅰ型胶原免疫反应性差异亦有统计学意义（p=0.001）。然而，两两比较显示，仅全身吡非尼酮组与对照组相比有显著降低。局部治疗在这些参数上未达到统计学显著性。

其他标志物：各组在上皮损伤、炎性浸润以及包括TGF-β1、α-SMA和CD4+细胞计数在内的纤维化激活标志物方面均无显著差异。

综合来看，这些结果提示局部和全身给药的吡非尼酮均可改善肉眼可见的声门狭窄，但全身给药在组织学和分子水平上表现出更强的抗纤维化作用。

专家评述

这些发现提供了新的临床前证据，支持将吡非尼酮作为降低喉部纤维化和狭窄的药物策略。局部和全身给药在减轻宏观狭窄方面疗效相当，这一点令人鼓舞，因为局部给药具有靶向治疗优势，且可能带来更少的全身不良反应。

然而，局部吡非尼酮未能带来显著的组织学改善，这引发了关于药物穿透、局部生物利用度及剂量有效性的疑问，仍需进一步优化。分子层面的分析提示，声门狭窄的发病机制复杂且多因素参与；抗纤维化药物必须有效到达并调控胶原合成通路，才能实现组织学重塑。

研究局限性包括样本量较小、动物模型与人类喉部疾病存在差异，以及局部吡非尼酮的药代动力学数据有限。此外，炎症和肌成纤维细胞激活标志物未见显著变化，提示该模型可能主要反映胶原沉积，而非对抗纤维化治疗敏感的活跃炎症阶段。

未来研究应探索局部制剂优化、给药频率调整及与抗炎药物联合应用的可能性，并进一步在更大型动物模型或临床试验中验证其转化价值。

结论

本研究表明，在博来霉素大鼠模型中，无论全身给药还是局部给药，吡非尼酮均可显著减轻肉眼可见的声门狭窄。全身给药还可进一步降低组织学纤维化和Ⅰ型胶原沉积，提示其抗纤维化作用更为强劲。局部吡非尼酮显示出作为一种更安全、侵入性更低的方案的潜力，但仍需进一步研究以确认并优化剂量策略，从而实现有效组织穿透和纤维化调控。

这些结果丰富了喉部纤维化药物治疗的证据基础，并提示吡非尼酮有望成为预防致残性声门狭窄的创新治疗候选药物，在耳鼻咽喉科领域具有潜在临床意义。

资金支持与ClinicalTrials.gov

该研究摘要未报告资金来源；由于这是临床前动物研究，因此不适用临床试验注册。

参考文献

1. Onder SS, Yilmaz B, Mengi K, Ekici AID, Surmeli M, Yilmaz AAS. Pirfenidone for Glottic Stenosis: Topical Versus Systemic Routes in a Bleomycin Rat Model. The Laryngoscope. 2026 Sep 15; PMID: 42742058.
2. King TE Jr, Bradford WZ, Castro-Bernardini S, et al. A phase 3 trial of pirfenidone in patients with idiopathic pulmonary fibrosis. N Engl J Med. 2014;370(22):2083-2092.
3. Hu J, Dai C, Li L, Liu Y. Transforming growth factor-β and fibrotic diseases. Front Pharmacol. 2020;11:315.
4. Schweiger C, Makrutzki M, Falcone V, et al. Advances in understanding and managing tracheal stenosis. Front Med (Lausanne). 2020;7:589944.