靶向NEK7介导的EGFR磷酸化：破解肝细胞癌仑伐替尼耐药的新策略

要点

• NEK7被确定为肝细胞癌（HCC）获得性仑伐替尼耐药的关键驱动因素。
• NEK7特异性地在EGFR的丝氨酸1070位点（serine 1070）磷酸化表皮生长因子受体（EGFR），从而激活下游MAPK和PI3K/AKT信号通路。
• 针对介导NEK7相关磷酸化的EGFR结构域设计的抑制性肽，能够在HCC模型中有效抑制仑伐替尼耐药。
• 靶向NEK7-EGFR相互作用，为克服晚期HCC治疗耐药提供了一种新的治疗策略。

研究背景与疾病负担

肝细胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）是全球癌症相关死亡的主要原因之一，且常在晚期被诊断，此时可选择的手术治疗方案有限。仑伐替尼（Lenvatinib）是一种多靶点激酶抑制剂，可靶向VEGFR、FGFR等，已被推荐作为不可切除HCC的一线系统治疗。尽管初始疗效明确，许多患者仍会发生获得性仑伐替尼耐药，进而导致疾病进展和预后不良。阐明该耐药背后的分子机制，对于开发可改善患者结局的新治疗方法至关重要。

研究设计

Huang等通过构建仑伐替尼耐药的HCC类器官和细胞系，旨在阐明驱动HCC获得性仑伐替尼耐药的机制。研究采用聚焦激酶的CRISPR-Cas9遗传筛选，筛选出与耐药表型相关的激酶。随后通过基因敲低/敲除以及肽抑制剂处理等功能实验，验证候选激酶的作用。机制研究进一步探讨了与耐药通路相关的蛋白相互作用及翻译后修饰。该研究整合了生化、细胞及类器官方法，为转化医学提供了重要见解。

主要发现与结果

NEK7被鉴定为耐药因子：激酶CRISPR-Cas9筛选确定NIMA相关激酶7（NEK7）是HCC模型中正向调控仑伐替尼耐药的关键基因。耐药细胞中NEK7表达升高，沉默NEK7后可显著恢复对仑伐替尼的敏感性。

NEK7介导EGFR第1070位丝氨酸磷酸化：生化分析显示，NEK7可与表皮生长因子受体（EGFR）发生物理结合。EGFR是一种广为人知的受体酪氨酸激酶，参与肿瘤生长及生存信号传导。NEK7可直接磷酸化EGFR上此前尚未明确的位点——丝氨酸1070（S1070）。值得注意的是，这一翻译后修饰可激活经典的EGFR下游信号级联。

MAPK和PI3K/AKT通路被激活：NEK7介导的EGFR S1070磷酸化增强了丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）和磷脂酰肌醇3激酶/AKT（PI3K/AKT）通路的活化。这些通路在促进肿瘤细胞增殖、生存以及对靶向治疗的耐受方面具有重要作用。

抑制性肽的治疗靶向作用：研究确定EGFR上覆盖第979至1099位氨基酸的结构域是NEK7介导磷酸化所必需的。针对该结构域定制设计的抑制性肽可有效阻断S1070位点磷酸化。使用这些肽后，仑伐替尼耐药HCC类器官和细胞系的生长受到抑制，显示出潜在治疗价值。

NEK7沉默的功能影响：在耐药模型中敲低或敲除NEK7可产生明显的抗肿瘤效应，包括降低细胞活力并恢复对仑伐替尼的敏感性。这些结果证实了NEK7作为耐药功能介导因子的作用。

专家点评

该研究为限制仑伐替尼在HCC中长期疗效的适应性耐药机制提供了较为充分的机制性证据。将NEK7鉴定为一种可在EGFR新型丝氨酸残基上介导磷酸化的激酶，推进了我们对癌症药物耐药中EGFR非经典调控方式的认识。尤其值得注意的是，这项工作强调了治疗压力下激酶信号重编程的复杂性。

从临床角度看，克服TKI耐药仍是晚期HCC管理中的重大未满足需求。靶向NEK7-EGFR轴有望成为绕开耐药的联合治疗策略。然而，转化过程中仍存在挑战，包括优化肽递送以及在体内验证其疗效和安全性。未来研究还应探讨患者样本中NEK7介导EGFR磷酸化的发生率，以及其作为耐药预测生物标志物的潜力。

尽管该研究聚焦于仑伐替尼，但也引出了更广泛的问题：NEK7是否还会影响其他酪氨酸激酶抑制剂或系统治疗药物的耐药，从而带来更广泛的临床意义。

结论

Huang等阐明了一种新的分子机制：NEK7诱导EGFR在丝氨酸1070位点磷酸化，进而激活MAPK和PI3K/AKT通路，驱动肝细胞癌对仑伐替尼产生获得性耐药。研究结果提示，通过特异性抑制性肽破坏NEK7-EGFR相互作用，可恢复药物敏感性并抑制肿瘤生长，具有可行的治疗前景。

这些发现加深了我们对HCC耐药中激酶信号重编程的理解，并提示NEK7可能是改善仑伐替尼耐药患者临床结局的有前景靶点。仍需进一步开展临床验证，并开发针对NEK7的治疗制剂，以推动这些结果转化为有效治疗方案。

经费与注册信息

本研究由机构及国家级癌症研究基金资助，具体信息见Huang等（2025）原始发表。

该临床前研究无临床试验注册号。

参考文献

1. Huang Q, Wang W, Ge Q, Xu D, Dong R, Chang R, Wu X, Mo J, Su C, Ning D, Liu Q, Liang H, Wang G, Chen J, Fu X, Chen X, Liang J, Zhang B. NEK7-induced phosphorylation of EGFR on serine 1070 drives the acquired lenvatinib resistance in hepatocellular carcinoma. Hepatology (Baltimore, Md.). 2025 Jul 22;84(2):378-395. doi: 10.1002/hep.32158. PMID: 40694824.
2. Finn RS, Kudo M, Merle P, et al. Lenvatinib versus sorafenib in first-line treatment of patients with unresectable hepatocellular carcinoma: A randomized phase 3 non-inferiority trial. Lancet. 2018;391(10126):1163-1173.
3. Yamada S, Yamamoto H, Matsuoka K. Mechanisms of resistance to tyrosine kinase inhibitors in hepatocellular carcinoma. Cancer Sci. 2021;112(4):1364-1377.