葡萄膜黑色素瘤二次治疗中的分子标志物稳定性与演变：基于重复基因分型与NGS的研究洞见

研究亮点

在葡萄膜黑色素瘤中，斑块放射治疗后重复进行基因表达谱（gene expression profiling，GEP）和PRAME状态检测，与初始评估结果具有较高一致性，稳定性超过80%。生物标志物状态的变化与肿瘤复发或耐药相关，提示其具有重要的预后意义。下一代测序（next-generation sequencing，NGS）结果在原发治疗与二次干预之间亦保持较高稳定性。

研究背景

葡萄膜黑色素瘤是成人最常见的原发性眼内恶性肿瘤，主要起源于脉络膜，并具有显著的转移风险和死亡风险。斑块放射治疗是一种常用的保眼治疗方式，但部分肿瘤会复发，从而需要实施如眼球摘除术或再次近距离放射治疗等二线干预。基因表达谱（GEP）分型、黑色素瘤中优先表达抗原（preferentially expressed antigen in melanoma，PRAME）状态，以及通过下一代测序（NGS）获得的基因突变谱，已成为预后判断和治疗决策的重要工具。

尽管这些标志物已被广泛应用，但其在放射治疗后的稳定性，以及在接受二次治疗的肿瘤中的变化情况，仍缺乏充分刻画。了解分子特征如何随肿瘤进展或放射暴露而演变，有助于制定监测策略并影响临床管理。

研究设计

本回顾性病例系列纳入49例接受初始斑块放射治疗后又接受二次治疗的脉络膜黑色素瘤患者。其中41例行眼球摘除术，8例接受二次斑块近距离放射治疗。每次手术干预均行细针穿刺活检（fine needle aspiration biopsy，FNAB）获取肿瘤样本，并使用DiagnosticDx-UM、DiagnosticDx-PRAME和DiagnosticDx-UMSeq检测（Castle Biosciences，Friendswood，TX）分别进行GEP分型、PRAME状态判定及NGS突变谱分析。

对首次与重复分子检测结果进行比较，评估GEP分型（通常为1A/1B/2型）、PRAME表达（阳性/阴性）以及NGS所示体细胞突变谱的一致性。另分析放射治疗后的肿瘤厚度以及GEP判别评分的变化，后者可反映风险分层强度。

主要发现

GEP分型一致性：在49例患者中，41例的GEP分型保持不变，一致率为83.6%（p = 0.07）。这提示，在原发治疗后、二次治疗前，用于界定肿瘤风险分层的分子特征总体上较为稳定。

PRAME状态稳定性：在31例具有配对PRAME结果的患者中，27例初次与复检活检之间PRAME表达一致（一致率87.1%；p = 0.625）。因此，PRAME这一与转移风险相关的重要标志物，在疾病进程中仍可作为可靠的预后指标。

NGS基因谱：17例具有配对NGS数据的患者在初次与二次手术之间均显示完全相同的突变谱。这表明，驱动肿瘤生物学行为的遗传改变在放射治疗和干预后仍基本保持不变。

特殊亚组——新生血管性青光眼：因新生血管性青光眼而行眼球摘除的15只眼，GEP分型和PRAME状态均未发生变化，提示无论是否存在这一严重的放射相关并发症，其分子特征均保持稳定。

肿瘤厚度与分子变化：出现GEP分型改变的患者，在初始治疗后的平均肿瘤厚度显著大于分型稳定者（p = 0.027），提示肿瘤负荷与分子演变之间可能存在关联。

判别评分动态变化：初始斑块放射治疗后，GEP判别评分显著下降（p < 0.05），提示放射可能诱导基因表达模式调节，这一变化或可反映肿瘤的生物学反应或微环境改变。

专家点评

研究结果进一步表明，葡萄膜黑色素瘤由GEP和PRAME所界定的基础分子分型，对初始斑块放射治疗所致变化具有较强稳健性，因此可较有信心地用于纵向风险评估。然而，部分患者出现的标志物变化，可能提示在疾病进展或治疗耐受过程中存在克隆演化或肿瘤微环境重塑。

稳定的NGS突变谱说明驱动性基因组改变基本保持不变，但放射及肿瘤再生长可能诱导影响表型的表观遗传和转录组学变化。因此，临床上应考虑在病情进展或治疗失败时重复进行分子检测，以优化预后判断并指导二次治疗。

本研究的局限性包括回顾性设计以及部分比较中样本量相对较小，尤其是配对NGS数据。未来仍需开展前瞻性研究，整合纵向分子终点和临床终点，以明确生物标志物变化的机制并优化管理流程。

结论

葡萄膜黑色素瘤在斑块放射治疗后的重复分子分型显示，GEP分型和PRAME状态具有较高一致性，证实其在随访风险分层中的应用价值。这些生物标志物的变化与肿瘤厚度增加相关，可能提示更具侵袭性的肿瘤生物学行为或需要二次治疗的耐药机制。稳定的NGS谱提示遗传驱动因素保持不变，而动态变化的基因表达则表明肿瘤与宿主之间的相互作用正在演变。将重复生物标志物评估纳入临床实践，有助于提升接受二次干预的葡萄膜黑色素瘤患者的个体化管理水平。

资助与临床试验

本研究由Castle Biosciences提供资助，并提供所使用的分子诊断检测。未报告ClinicalTrials.gov登记号。